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食品添加劑喹啉黃檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)中非色素有機(jī)物2-甲基喹啉、鄰苯二甲酸和2,6-二甲基喹啉的檢

方案概述

前言：

隨著食品工業(yè)的快速發(fā)展，食品添加劑的安全性已成為全球關(guān)注的焦點(diǎn)。近年來(lái)，2-甲基喹啉、鄰苯二甲酸及其衍生物、2,6-二甲基喹啉等化學(xué)物質(zhì)因其潛在的毒理學(xué)效應(yīng)引發(fā)廣泛擔(dān)憂。研究表明，這些化合物可能通過(guò)食品包裝遷移或非法添加等途徑進(jìn)入食品鏈，對(duì)人體健康構(gòu)成多重威脅。2-甲基喹啉作為喹啉類衍生物，已被證實(shí)對(duì)皮膚、黏膜和呼吸道具有顯著刺激性，長(zhǎng)期接觸可能引發(fā)致突變效應(yīng)。鄰苯二甲酸類化合物作為增塑劑，可通過(guò)干擾內(nèi)分泌系統(tǒng)導(dǎo)致生殖發(fā)育異常、神經(jīng)功能障礙，甚至與癌癥發(fā)生相關(guān)。世界衛(wèi)生組織已將其列為2B類致癌物，歐盟等多國(guó)已實(shí)施使用限制。2,6-二甲基喹啉雖缺乏直接毒理學(xué)數(shù)據(jù)，但同類物質(zhì)6-甲基喹啉的研究顯示，其具有眼部持久性損傷和潛在致突變性，提示需警惕結(jié)構(gòu)類似物的生物累積風(fēng)險(xiǎn)。

本次實(shí)驗(yàn)參考了GB 1886.104-2024 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑喹啉黃，采用皖儀科技高效液相色譜儀LC3200系列配置二極管陣列檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，系統(tǒng)適用性測(cè)試2-甲基喹啉、鄰苯二甲酸和2,6-二甲基喹啉峰型良好，目標(biāo)峰周圍無(wú)雜峰，理論塔板數(shù)高，滿足試驗(yàn)要求。曲線相關(guān)系數(shù)R值均在0.9999以上。2-甲基喹啉、鄰苯二甲酸和2,6-二甲基喹啉保留時(shí)間重復(fù)性分別為0.049%、0.073%和0.063%；峰面積重復(fù)性分別為0.524%、0.349%和0.436%，重復(fù)性較好。2-甲基喹啉、鄰苯二甲酸和2,6-二甲基喹啉檢出限測(cè)試結(jié)果分別為0.251mg/L、0.053mg/L和0.075mg/L。樣品測(cè)試未檢出。以上數(shù)據(jù)均滿足藥典方法對(duì)于儀器的要求。

關(guān)鍵詞：2-甲基喹啉；鄰苯二甲酸；2,6-二甲基喹啉；高效液相色譜法；二極管陣列檢測(cè)器。

1.實(shí)驗(yàn)方法

1.1儀器配置

表1 高效液相色譜系統(tǒng)配置清單

序號(hào)	名稱	數(shù)量
1	LC3200系列高效液相色譜儀	1
2	P3210Q四元低壓梯度泵	1
3	DAD3260二極管陣列檢測(cè)器	1
4	CT3400全溫度柱溫箱	1
5	AS3210全自動(dòng)進(jìn)樣器	1

1.2實(shí)驗(yàn)材料及輔助設(shè)備

甲醇：色譜純；

乙酸：色譜純；

乙酸銨：優(yōu)級(jí)純；

2-甲基喹啉標(biāo)準(zhǔn)品；

鄰苯二甲酸標(biāo)準(zhǔn)品；

2,6-二甲基喹啉。

1.3測(cè)試條件

表2 高效液相色譜條件

色譜柱	Nova Atom SC18 4.6×250mm 5μm色譜柱
流速	1mL/min
柱溫	35 ℃
流動(dòng)相	A相：乙酸銨水溶液與甲醇體積比為95:5 B相：甲醇
波長(zhǎng)	254nm
進(jìn)樣量	5μL

表3 流動(dòng)相洗脫程序

時(shí)間（min）	A相	B相
0	100	0
5	100	0
25	0	100
30	0	100
31	100	0
36	100	0

1.4 溶液配制

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液

分別稱取鄰苯二甲酸、2-甲基喹啉、2,6-二甲基喹啉標(biāo)準(zhǔn)各10mg(精確至0.01mg),分別用流動(dòng)相A溶解并定容至10mL容量瓶中,配制成1000mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液在4℃以下避光密封冷藏保存,有效期為1個(gè)月)。分別吸取一定量的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用流動(dòng)相A稀釋成濃度為1mg/L、5mg/L、10mg/L、50mg/L、100mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。

1.4.2 實(shí)驗(yàn)前處理

稱取試樣約0.1g(精確至0.0001g),用流動(dòng)相 A 溶解,轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,于超聲波發(fā)生器中溶解、脫氣,冷卻至室溫,定容,進(jìn)樣前用針式過(guò)濾器過(guò)濾。

2.結(jié)果與討論

2.1 系統(tǒng)適用性

圖1 系統(tǒng)適用性測(cè)試譜圖

表4系統(tǒng)適用性測(cè)試數(shù)據(jù)

名稱	保留時(shí)間(min)	峰面積(mAU*s)	理論塔板數(shù)
鄰苯二甲酸	6.745	272.108	8603
2-甲基喹啉	21.615	571.588	263658
2,6-二甲基喹啉	23.611	506.642	350910

說(shuō)明：由上述表格可見，系統(tǒng)適用性測(cè)試2-甲基喹啉、鄰苯二甲酸和2,6-二甲基喹啉峰型良好，目標(biāo)峰周圍無(wú)雜峰，理論塔板數(shù)高，滿足試驗(yàn)要求。

2.2 曲線測(cè)試

圖2 鄰苯二甲酸測(cè)試曲線

圖3 2-甲基喹啉測(cè)試曲線

圖4 2,6-二甲基喹啉測(cè)試曲線

說(shuō)明：實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，鄰苯二甲酸、2-甲基喹啉和2,6-二甲基喹啉曲線相關(guān)系數(shù)R值均在0.9999以上，滿足實(shí)驗(yàn)要求。

2.3 重復(fù)性測(cè)試

圖5 6針50mg/L標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)性測(cè)試譜圖

表5 6針50mg/L標(biāo)準(zhǔn)品保留時(shí)間測(cè)試數(shù)據(jù)

化合物名	鄰苯二甲酸	2-甲基喹啉	2,6-二甲基喹啉
保留時(shí)間(min)	6.691	21.631	23.628
	6.685	21.645	23.635
	6.691	21.651	23.648
	6.691	21.608	23.605
	6.691	21.645	23.641
	6.695	21.645	23.631
平均值	6.691	21.637	23.631
RSD（%）	0.049	0.073	0.063

表6 6針50mg/L標(biāo)準(zhǔn)品峰面積測(cè)試數(shù)據(jù)

化合物名	鄰苯二甲酸	2-甲基喹啉	2,6-二甲基喹啉
峰面積(mAU*s)	138.455	300.613	260.675
	138.290	301.422	260.252
	136.979	298.665	257.661
	137.281	299.040	259.170
	137.339	300.612	258.349
	136.655	299.870	259.147
平均值	137.500	300.037	259.209
RSD（%）	0.524	0.349	0.436

說(shuō)明：由上表數(shù)據(jù)可知，2-甲基喹啉、鄰苯二甲酸和2,6-二甲基喹啉保留時(shí)間重復(fù)性分別為0.049%、0.073%和0.063%；峰面積重復(fù)性分別為0.524%、0.349%和0.436%，重復(fù)性較好。

2.4 檢出限測(cè)試

圖6 1mg/L標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試譜圖

表7 1mg/L標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試數(shù)據(jù)

名稱	保留時(shí)間(min)	峰面積(mAU*s)	信噪比
鄰苯二甲酸	6.695	3.100	11.993
2-甲基喹啉	21.675	16.192	56.996
2,6-二甲基喹啉	23.655	4.948	40.115